Бактерия гафния

Клинико-эпидемиологические особенности гафниоза человека

Бактериовыделение Hafnia alvei

Выросшие колонии дифференцировались нами с помощью батареи биохимических тестов, которая включала в себя, помимо традиционно применяемых, определение фенилаланиндекарбоксилазы, бета-галактозидазы, образование сероводорода, ферментацию лактозы, утилизацию цитрата натрия, малоната натрия, наличие или отсутствие подвижности.

Оглавление:

Родовая принадлежность с помощью такого комплекса признаков устанавливается в 95,7% и в 63,2% случаев удаётся идентификация до вида. Учитывая, что род Hafnia представлен единственным видом – H. alvei – подобную точность исследований мы сочли достаточной. Дифференциально-диагностические признаки, которыми мы руководствовались при идентификации вида H. alvei, представлены нами в таблице 2:

Таблица 2 – Биохимическая идентификация H. аlvei

Кроме того, известно, что энтеропатогенность гафний подвергается сомнению в связи с тем, что ряд сообщений о кишечных инфекциях, вызванных гафниями, у людей, как показали дальнейшие исследования, были обусловлены неверной идентификацией Escherichia albertii, обладающей сходными с H. alvei биохимическими характеристиками, включая неспособность к продукции индола, недостаточную ферментацию лактозы и D-сорбитола, а также сходный профиль антибиотикорезистентности. Однако известно, что представители рода Escherichia, включая E. coli и E. albertii, в 100% показывают активность глютамат-декарбоксилазы (ГД), в то время как все гафнии являются ГД-отрицательными. В этой связи мы дополнительно проводили тест на ГД по Rice et al., 1993. Определение активности ГД выполнялось в одной пробирке. Изменение цвета среды с голубого на жёлтый расценивалось нами как положительная реакция, штамм идентифицировался как эшерихия и исключался из дальнейшего исследования.

Биотипы Hafnia alvei (согласно модифицированной схеме биотипов H. alvei по Barbe) идентифицировались на основании гидролиза эскулина и арбутина (48 ч.) и ферментации D-арабинозы, салицина, лактозы, раффинозы и адонитола (72 ч.). Реакции ферментации оценивались по изменению окраски бульона, содержащего индикатор Андреде.

Все сыворотки у больных с ОКИ, сопровождавшимися выделением H. alvei (концентрация 106 в 1 г патологического материала и выше), исследованы в реакции агглютинации (РА) на наличие антител к аутоштамму. Для этого из клинических штаммов гафний готовили взвесь живой 20-часовой культуры для обнаружения H-агглютинации, а из кипячёной суточной агаровой культуры — для обнаружения O-агглютинации. Исследовались сыворотки, полученные в течение 72 часов и через 7-10 дней с момента заболевания.

Работа выполнена в период гг. Для эпизоотологической характеристики гафниоза было проведено определение естественной заражённости H. alvei 337 особей диких животных разных видов, а также 436 голов сельскохозяйственных и домашних животных (собак). Материалом исследования служило кишечное содержимое животных. Бактериологическое исследование проводилось по методике, описанной выше.

Анализ уровня заболеваемости гафниозом людей проводился нами для первичной оценки эпидемиологического и социального значения данной нозологии в Семипалатинском регионе Восточно-Казахстанской области. Для этого в период с 2001 по 2008 годы на основании клинико-лабораторных данных (включая бактериологическое подтверждение диагноза и реакцию агглютинации с аутоштаммом) нами были отобраны 190 подтверждённых случаев гастроинтестинального внебольничного гафниоза человека для последующего анализа. Нами был проведён расчёт показателей инцидентной заболеваемости за год по отношению к численности населения Восточно- Казахстанской области (население риска – 1416,4 тысяч человек). Была изучена многолетняя динамика заболеваемости гафниозом (определение тенденции, периодичности). Для выявления основной тенденции в развитии эпидемического процесса (рост, снижение) использовалось выравнивание динамических рядов с помощью расчёта теоретического уровня заболеваемости методом наименьших квадратов.

Распространение Hafnia alvei среди диких, синантропных и сельскохозяйственных животных в Семипалатинском регионе Восточно- Казахстанской области

Хотя мы не ставили основной задачей настоящей работы изучение заражённости Hafnia alvei всех диких млекопитающих, представленных на территории Семипалатинского региона ВКО, однако проведённые нами выборочные исследования животных, отловленных в естественных биотопах, показали, что гафнии часто встречаются в составе микрофлоры кишечника многих диких видов, относящихся к семействам насекомоядных, грызунов и зайцеобразных. Наиболее часто животные-носители гафний встречались среди зацеобразных (заражённость 71,05%) и грызунов (серая крыса – заражённость 60,14% и домовая мышь – заражённость 51,61%). Последние два вида являлись основным источником возбудителя инфекции и в синантропных биотопах.

Сравнительный анализ территориального распределения обсеменённости диких животных Hafnia alvei как в естественных, так и искусственных биотопах показал её неравномерность и приуроченность к поймам и надпойменным участкам практически всех крупных рек, протекающих по территории (Иртыш, Кокпекты, Баканас, Аягуз и др.) – 214 животных (63,5%), причём на селитебной территории в 100% случаев заражённые животные были представлены домовой мышью и серой крысой (последняя, судя по числу попаданий в ловушки, доминирует среди грызунов в населённых пунктах Семипалатинского региона). Высокая концентрация зверьков, а также их постоянный контакт с дико-живущими грызунами создают условия для взаимообмена гафниями и заноса инфекции в населённые пункты, обсеменения почвы, растительности, пищевых продуктов.

Анализ сезонной динамики заражённости диких животных показал, что наибольшее количество зверьков, от которых была выделена Hafnia alvei, отлавливались весной (112 или 33,2%) и летом (58 или 17,2%). Весенне-летний пик выделения гафний среди диких животных может быть причиной подъёма заболеваемости среди людей, контактирующих с синантропными грызунами.

Для установления возможной взаимосвязи между эпидемическим и эпизоотическим процессами гафниоза мы провели исследование на обсеменённость гафниями содержимого кишечника сельскохозяйственных животных, а также собак. Анализ показал, что наиболее частым резервуаром гафний служил крупный рогатый скот (показатель заражённости 42,38%), который также выступал в качестве источника бактериального обсеменения оборудования коровников: отмечалось выделение гафний в смывах с молочных бидонов и вёдер для доения. Достаточно часто Hafnia alvei выделялась и от мелкого рогатого скота: показатель заражённости исследованного поголовья составил 40,5%. Совместное содержание и выпас КРС и МРС, практикуемое в индивидуальных хозяйствах владельцев животных в настоящее время, по-видимому, приводит к взаимному обсеменению животных гафниями и массивному бактериальному загрязнению окружающей среды. По сравнению с КРС и МРС лошади значительно реже оказывались носителями гафний (показатель заражённости составил лишь 19,05%), несмотря на то, что по данным литературы, именно у лошадей гафнии вызывают инфекционные аборты [Mukherjee S.R. et al., 1986]. Учитывая тесный контакт приотарных и дворовых собак в частных подворьях с КРС и МРС, высокий уровень заражённости гафниями этих животных является вполне закономерным (43,75%). Для установления этиологической роли гафний как возбудителя инфекции (в том числе и латентно протекающей) у сельскохозяйственных животных мы провели исследование в реакции агглютинации (РА) с аутоштаммом сывороток, полученных от КРС и лошадей. Серологические исследования животных-носителей Hafnia alvei показали высокий процент положительных реакций на наличие противогафниозных антител у КРС – 14,1% (титры в РА составили 1:20-1:80). У лошадей, напротив, ни в одном случае носительства гафний противогафниозных тел к аутоштамму выявлено не было.

Основные характеристики эпидемического процесса внебольничного

гастро-интестинального гафниоза человека

В Республике Казахстан официальная регистрация случаев гафниоза человека (как нозокомиального, так и внебольничного) не ведётся; более того, рутинная бактериологическая диагностика инфекций, обусловленных возбудителями рода Hafnia, осуществляется только в двух областях Казахстана: Актюбинской и Атырауской. Тем не менее, анализ даже этих данных не имеет смысла, поскольку не проводится окончательная верификация бактериологического диагноза гафниоза путём постановки ПЦР, проведения фагодиагностики с использованием специфических противогафниозных бактериофагов, либо постановки теста на активность глютамат- декарбоксилазы. Учитывая трудности, возникающие при проведении дифференциации гафний от представителей родов Enterobacter, Escherichia и Salmonella, мы использовали только собственные данные о случаях гафниоза. Каждый случай изоляции гафний от больного был, помимо описанных выше биохимических тестов, верифицирован нами путём определения активности ГД, и в исследование включались только ГД-отрицательные штаммы.

В период с 2001 по 2008 годы на основании клинико-лабораторных данных (включая бактериологическое подтверждение диагноза и реакцию агглютинации с аутоштаммом) нами были отобраны 190 подтверждённых случаев гастроинтестинального внебольничного гафниоза человека для последующего анализа. Нами был проведён расчёт показателей инцидентной заболеваемости за год по отношению к численности населения Восточно- Казахстанской области (население риска — 1416,4 тысяч человек).

Число случаев заболеваний гафниозом в Семипалатинском регионе ВКО подвержено колебаниям в различные годы, но, за исключением 2007 года, нет существенных отклонений в числе заболевших по сравнению со средним уровнем за 8 лет исследования (23,75). Мы не смогли воспользоваться методом C2 для расчёта пороговых уровней заболеваемости в связи с недостаточным числом лет наблюдения, поэтому воспользовались методом процентилей. Расчёт показал, что стандартное отклонение вариационного ряда составило 15,04, а значит, число заболевших гафниозом в 2007 году превысило пороговый уровень (3 стандартных отклонения – 45,12).

Хотя число заболевших гафниозом в 2007 году и превышает рассчитанный пороговый уровень, мы не склонны рассматривать данный подъём как вспышку, поскольку анализ случаев не выявил факторов (источники

возбудителя инфекции), которые позволили бы объединить эти случаи. Скорее всего, имело место искусственное увеличение числа заболевших за счёт улучшения диагностики заболевания и возросшего интереса медицинских работников к данному заболеванию. Таким образом, интенсивность эпидемического процесса гастроинтестинального гафниоза в Семипалатинском регионе ВКО составляетслучаев в год (со средним числом заболевших 24 случая), что соответствует числу заболевших другими ОКИ, вызванными условно-патогенной флорой (УПФ).

Для изучения удельного вклада бактерий рода Hafnia в этиологическую структуру ОКИ, вызванных УПФ, нами был проведён анализ процентного соотношения условно-патогенных агентов, выделенных в тех лечебных учреждениях, где нами проводился отбор пациентов с гафниозом, в период с 2003 по 2005 годы (таблица 3).

Таблица 3 – Этиологическая структура острых кишечных инфекций, вызванных условно-патогенной флорой

Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.

Источник: http://xn--d1acjmiy6ee.xn--p1ai/avtoreferati/821-2-kliniko-epidemiologicheskie-osobennosti-gafnioza-cheloveka.php

Гафнии (род Hafnia)

Гафнии — условно-патогенные бактерии, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae, роду Hafnia. Типовой вид (единственный) — Hafnia alvei. Гафнии — прямые грамотрицательные палочки размером 1,0×2,0-5,0 мкм. Подвижны (перитрихи). Факультативные анаэробы. Встречаются в фекалиях человека и животных, включая птиц, в сточных водах, почве, воде, молочных продуктах. У больных со сниженным иммунитетом вызывают кишечные инфекции, уроинфекции, пневмонию, сепсис.

Все права защищены. Копирование материалов возможно только с разрешения администрации сайта.

Источник: http://medpuls.net/guide/microbiology/gafnii-rod-hafnia

Бактерия гафния

HAFNIA (син.: Enterobacter hafniae, Paracolon aerobacter 32011, Paracolon aerogenes) — род бактерий семейства Enterobacteriaceae, получивший название от лат. формы старого названия города Копенгагена. Впервые описан Меллером в 1954 г.

HAFNIA относят к условно патогенным микроорганизмам. Описаны вспышки острых кишечных заболеваний, случаи поражения моче-полового тракта, пневмонии, септицемии, вызванные Н. Указанные бактерии могут выделяться и от практически здоровых людей. Доказана патогенность этих бактерий для ос и пчел. Наряду с другими микроорганизмами могут вызывать порчу пива. Выделяются из воды, почвы, из гнилых продуктов.

HAFNIA — тонкая подвижная палочка (встречаются неподвижные варианты, особенно при выращивании при t° 37°), перитрих, спор и капсул не образует, факультативный аэроб. По Граму красится отрицательно.

Хорошо растет на обычных питательных средах. Для выделения в чистой культуре патол, материал засевают на среды Плоскирева, Эндо (см. Эндо среда). Как и все представители семейства кишечных бактерий, гидролизует глюкозу, восстанавливает нитраты до нитритов, не обладает цитохромоксидазой. Кроме того, HAFNIA растет на среде в присутствии цианистого калия, обладает способностью декарбоксилировать лизин и орнитин, гидролизует арабинозу, ксилозу, рамнозу, мальтозу, маннит и глицерин, не образует индола и сероводорода, не содержит аргиназы и дезаминазы фенилаланина, не гидролизует сорбита, дульцита, инозита, адонита, раффинозы. Гидролиза мочевины не вызывает, желатину не разжижает, не утилизирует D-тартрат и мукат, цитрат натрия утилизирует слабо. Лактозу и сахарозу гидролизует слабо или не гидролизует совсем. По отношению к салицину, целлобиозе и малонату натрия ведет себя различно. Реакция Фогеса—Проскауэра (см.Фогеса-Проскауэра реакция) положительная при t° 22°, при t° 37° возможны различные варианты. Реакция с метиловым красным положительная при t° 37° и отрицательная при t° 22°. Перечисленные признаки используются для идентификации бактерий H.

У HAFNIA описаны О-, Н- и (у нек-рых представителей) альфа-антигены. Серол, идентификация выделенных штаммов проводится в соответствии с антигено-диагностической схемой, включающей 39 серол. O-групп и 36 разновидностей Н-антигена (см. Бактерии, антигены бактерий).

Библиогр.: Батуро А. П. Об идентификации бактерий Hafnia, Лаборат, дело, Jsle 7, с. 430, 1972; Кагановская С. Н. и Б а т у р о А. П. Изучение штаммов Hafnia, выделенных из различных источников, Журн, микр., эпид, и иммун., № 4, с. 85, 1973; Bergey’s manual of determinative bacteriology, ed. by R. E. Buchanan a. N. E. Gibbons, Baltimore, 1975, bibliogr.; Edwards P. R. a. Ewing W. H. Identification of enterobacteriaceae, Minneapolis, 1972; О ye E. Hafnia, в кн.: Enterobacteriaceae — In-fektionen, hrsg. v. J. Sedlak u. H. Rische, S. 603, Lpz., 1968, Bibliogr.

Источник: http://xn--90aw5c.xn--c1avg/index.php/HAFNIA

Заболевания, вызванные условно-патогенными

Энтерогеморрагические кишечные палочки (ЭГКП)

Иммунитет

Экология и эпидемиология

Энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП)

Энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП)

Энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП)

Заболевания, вызванные условно-патогенными энтеробактериями

Протейные инфекции

Цитробактер инфекции

Энтеробактер-инфекции

Гафния-инфекциии

Серациозы

Эдвардсиелез

Провиденция-инфекции

Плоскирева

Инфекционисты в Москве

Цена: 1700 руб. 1530 руб.

Специализации: Терапия, Гепатология, Инфекционные болезни.

Записаться на прием со скидкой 170 руб. Нажимая на «Записаться на прием», Вы принимаете условия пользовательского соглашения и даете свое согласие на обработку персональных данных.

Цена: 1500 руб. 1350 руб.

Специализации: Инфекционные болезни.

Записаться на прием со скидкой 150 руб. Нажимая на «Записаться на прием», Вы принимаете условия пользовательского соглашения и даете свое согласие на обработку персональных данных.

Цена: 3500 руб. 1750 руб.

Специализации: Аллергология, Иммунология, Инфекционные болезни.

Записаться на прием со скидкой 1750 руб. Нажимая на «Записаться на прием», Вы принимаете условия пользовательского соглашения и даете свое согласие на обработку персональных данных.

  • Хирургический профиль
  • Абдоминальная хирургия
  • Акушерство
  • Военно полевая хирургия
  • Гинекология
  • Детская хирургия
  • Кардиохирургия
  • Нейрохирургия
  • Онкогинекология
  • Онкология
  • Онкохирургия
  • Ортопедия
  • Оториноларингология
  • Офтальмология
  • Сосудистая хирургия
  • Торакальная хирургия
  • Травматология
  • Урология
  • Хирургические болезни
  • Эндокринная гинекология
  • Терапевтический профиль
  • Аллергология
  • Гастроэнтерология
  • Гематология
  • Гепатология
  • Дерматология и венерология
  • Детские болезни
  • Детские инфекционные болезни
  • Иммунология
  • Инфекционные болезни
  • Кардиология
  • Наркология
  • Нервные болезни
  • Нефрология
  • Профессиональные болезни
  • Пульмонология
  • Ревматология
  • Фтизиатрия
  • Эндокринология
  • Эпидемиология
  • Стоматология
  • Детская стоматология
  • Ортопедическая стоматология
  • Терапевтическая стоматология
  • Хирургическая стоматология
  • Другое
  • Диетология
  • Психиатрия
  • Генетические болезни
  • Заболевания передающиеся половым путем
  • Микробиология
  • Популярные болезни:
  • Герпес
  • Гонорея
  • Хламидиоз
  • Кандидоз
  • Простатит
  • Псориаз
  • Сифилис
  • ВИЧ — инфекция

весь материал представлен для ознакомительных целей

Источник: http://vse-zabolevaniya.ru/mikrobiologija/zabolevanija-vyzvannye-uslovno-patogennymi.html

Штамм бактерий hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный лт-энтеротоксин

Владельцы патента RU:

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин. Штамм депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294. Штамм обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин. 1 табл., 2 пр.

Предлагаемое изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин.

Техническим результатом изобретения является штамм Hafnia alvei №294, который выделен от больного с кишечной инфекцией в 2011 году в Муниципальном учреждении здравоохранения города Ишимбай республики Башкортостан, депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294, обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин.

Штамм Hafnia alvei ГКПМ №294 характеризуется следующими признаками.

По биохимическим свойствам штамм относится к семейству Enterobacteriaceae рода Hafnia alvei, поскольку при тестировании на микробиологическомй тест-системе версии «Vitek 2 Sistems: 04/01» соответствовал биохимическим свойствам этого вида.

Растет на обычных универсальных плотных питательных средах с образованием характерных изолированных колоний желтоватого оттенка. В мясопептонном бульоне вызывает равномерное помутнение с выпадением осадка.

Изучение факторов вирулентности показало, что штамм является редким, обладающим комплексом факторов патогенности, способным вызывать острую токсическую пневмонию мышей (гибель животных в течение 3 часов), некроз кожи кролика (3,5 см в диаметре), отек лап мышей (с разницей 95 мг), петля тонкого кишечника кролика 1,2(V/L), обладает (альфатиолзависимый, энтерогемолизин), адгезивной (положительная Д-маннозочувствительная и Д-маннозорезистентная реакция с эритроцитами цыпленка), антиинтерфероновой, антилизоцимной активностями, способный в протистоцидном тесте вызывать гибель инфузорий-туфелек в течение 45 секунд.

Данный штамм рекомендуется в качестве суперпродуцента термолабильного ЛТ-энтеротоксина и как штамм, обладающий комплексом факторов патогенности. Штамм можно использовать в производстве анатоксинов и для получения антитоксической сыворотки.

Способы определения активности ЛТ-энтеротоксина.

Субплантарное введение мышам весомг 0,05 мл центрифугата 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки более 100 мг. Аксенова Е.В., 1980 г.

Интраназальное введение 0,05 мл 20-часовой бульонной культуры вызывает острую токсическую пневмонию у белых мышей-самцов весомг (гибель в течение 4 часов). Войно-Ясенецкая Н.К., 1957 г.

Внутримышечное введение 300 млн микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 3 см.

В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 80 млн м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L=l,2).

Гретый при 56°С в течение 45 мин центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100°С 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L=0,3).

Условия хранения культуры после лиофильной сушки в ампуле или выращенной при 37°С на 0,3%-ном МПА (рН 7,2-7,4), залитым стерильным вазелиновым маслом, при температуре 4°С.

Среды для размножения — бульон Хоттингера (рН 7,2), мясопептонной агар, содержащий 5% эритроцитов кролика при температуре 37°С в течение 24 часов.

Генетические особенности: HLy+, Ent+, MS+, MR+, LT+, ALA+, AKA+. Устойчив к ампициллину, ампициллину/сульбактам, цефуроксимаксетину, чувствителен к фторхинолону.

0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры в физиологическом растворе сеют в стерильный бульон Хотингера (5 мл рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 часов, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 7 минут. Полученную надосадочную жидкость (центрифугат) в объеме 0,05 мл вводят субплантарно в заднюю левую лапку мышей-самцов весомг. Через 24 часа животных умерщвляют эфиром и ампутированные по голеностопному суставу лапки взвешивают на торсионных весах, при этом центрифугат штамма Hafnia alvei №294 давал разницу между левой и правой лапками не менее 100 мг, остальные 20 штаммов, способные продуцировать ЛТ-энтеротоксин от 65 до 90 мг. Контроли — нативный стерильный бульон Хоттингера (рН 7,2) и гретый при 56°С центрифугат 20-часовой бульонной культурымг, соответственно.

Результаты приведены в таблице.

0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры сеют в бульон Хоттингера (рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 ч и 80 млн м.т. суспензию в объеме 1 мл вводят в сегмент изолированной петли тонкого кишечника кролика. Через 16 часов животных умерщвляют воздушной эмболией и рассчитывают соотношение объема экссудата к длине сегмента (V/L). При этом 20-часовая бульонная культура штамма Hafnia alvei №294 оказалась способной давать накопление жидкости в большом количестве и показатель V/L составил 1,2. У остальных 20 штаммов, способных продуцировать ЛТ-энтеротоксин, показатель V/L колебался в пределах 0,9-1,0. При введении стерильного бульона Хоттингера и гретой при 100°С 20-часовой бульонной культуры отношение объема накопленной жидкости к длине сегмента составило 0,25 и 0,3 соответственно.

Штамм бактерий Hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин, депонированный в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов III-IV групп патогенности ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294.

Источник: http://www.findpatent.ru/patent/251/.html

Бактерия гафния

Никто не войдет не замеченным: Двери входные китай.

Гафниоз (инфекционный понос, паратиф) — инфекционная болезнь, возбудитель которой размножается в кишечнике и гемолимфе пчел. Кроме медоносных пчел болеют осы. Возбудитель — Hafnia alvei — подвижная палочка длиной 1—2 мкм и шириной 0,3—0,5 мкм. Относится к семейству энтеро-бактеров. Спор не образует, грамнегативная, хорошо окрашивается всеми анилиновыми красителями. Гафния растет на обычных питательных средах. При росте на агаре в первые сутки обнаруживаются мелкие голубоватые полупрозрачные колонии, сливающиеся на вторые сутки в общее наложение с мутноватым оттенком, в последующем отмечается побурение центра колонии. При росте на МПБ среда мутнеет, иногда появляются пленки на поверхности. Микроорганизм желатин не разжижает, молоко не свертывает, на картофеле образует буровато-желтое или серое наложение с неприятным запахом. Гафния разлагает мальтозу, фруктозу, глюкозу, арабинозу, ксилозу, рамнозу, глицерин, маннит, галактозу; не разлагает лактозу, сахарозу, декстрин. Возбудитель гафниоза в пустых инфицированных ульях сохраняет жизнеспособность до 270 дней, в перге — до 300 дней, в меде при комнатной температуре — до 90 дней. Кипячение в воде вызывает его гибель в течение 1—2 мин, 0,5%-ный раствор гидроксида натрия при температуре 18—20 °С убивает микроорганизмы в течение 35—85 мин, 3—5%-ный раствор фенола или формалина — в течение 1—5 мин.

Болезнь встречается на пасеках многих стран мира. Заболевание регистрируется чаще всего в конце зимы и весной. Его появлению способствуют неблагоприятные условия содержания пчелиных семей: высокая влажность в улье, недостаточное утепление гнезд, дождливая и холодная погода и т. д. Тяжело протекает заболевание при наличии в меде пади, большого количества незапечатанного меда, недостатке перги. Возбудитель передается от больных пчелиных семей к здоровым при подкормке инфицированными медом и пергой, пользовании общей поилкой, использовании инфицированных ульев и другого пчеловодного инвентаря. В годы, благоприятные для развития болезни, заболевание протекает очень тяжело, вызывая резкое ослабление и гибель большого количества пчелиных семей.

Возбудитель с кормом и водой попадает в пищеварительную систему пчел и при пониженной резистентное™ организма быстро размножается, вызывая интоксикацию. В результате нарушаются процессы расщепления и всасывания питательных веществ, усиливается перистальтика кишечника. При проникновении возбудителя в гемолимфу и его интенсивном размножении отмечают септицемию, которая приводит к гибели пчел.

Инкубационный период длится от 3 до 14 дней. При заболевании в конце зимы отмечают возбуждение (шум) пчелиных семей, распад зимнего клуба, много пчел выходят через летковый заградитель. Ползающие пчелы выглядят слабыми, скованными в движениях, брюшко у них сильно увеличено. Часто наблюдается диарея, фекалии жидкие, клейкие, коричневого цвета, с неприятным запахом. Пчелы теряют способность к полету и погибают. Некоторые семьи ко времени выставки из зимовника вследствие гибели большого количества пчел резко ослаблены. Весной больные семьи вяло совершают очистительный облет. Передняя стенка улья и соты испачканы экскрементами желто-бурого цвета, неприятного запаха, на дне улья множество мертвых пчел. Большинство семей ослабевают и погибают. При исследовании кишечника больных пчел обнаруживают содержимое грязно-белого или светло-серого цвета. В начале лета больные семьи отстают в развитии, плохо отстраивают соты и не используют медосбор.

Ставят его на основании эпизоотологических данных, результатов лабораторных исследований. Для этого выделяют чистую культуру возбудителя из мышц или гемолимфы пчел. При бактериологических исследованиях следует иметь в виду, что Hafnia alvei при 20 °С приобретает подвижность, расщепляет нитрат аммония, а при 37 °С она теряет эти свойства. Наряду с этим при диагностике гафниоза ставят биопробу на пчелах. Дифференциальный диагноз. Гафниоз необходимо отличать от колибактериоза, сальмонеллеза, септицемии, Нозематоза и падевого токсикоза.

На пасеках следует строго соблюдать ветеринарно-санитарные правила содержания и кормления пчелиных семей.

Меры борьбы. При установлении заболевания пасеку объявляют неблагополучной и проводят мероприятия в соответствии с Инструкцией по предупреждению и ликвидации заразных болезней пчел. Ульи, вставные доски, потолочины, рамки тщательно очищают и орошают (из расчета 1 л на 1 м2 поверхности) одним из следующих растворов: 3%-ным горячим (70 °С) раствором гидроксида натрия при экспозиции 2 ч; теплым (30 °С) щелочным раствором формальдегида, содержащим 3 % формальдегида и 3 % гидроксида натрия, при экспозиции Зч. После дезинфекции их промывают водой и высушивают. Загрязненные экскрементами соты перетапливают на воск. Пустые соты, пригодные для дальнейшего использования, опрыскивают с обеих сторон до заполнения ячеек 1%-ным раствором од-нохлористого Йода при экспозиции 3 ч или 2%-ным раствором формальдегида при экспозиции 4 ч. Дезинфицирующий раствор удаляют встряхиванием рамки, после чего ее промывают водой и просушивают. Халаты, полотенца, лицевые сетки кипятят в воде в течение 10 мин. Воск от пчелиных семей неблагополучной пасеки направляют на технические цели или обеззараживают в автоклаве при температуре 127 °С в течение 2 ч.

Мед, полученный от больных семей, хранят в закрытой таре и используют только для пищевых целей. Использовать такой мед для подкормки пчелиных семей запрещено.

Больным семьям дают лечебный сироп с левомицетином и неомицином трехкратно с интервалом в 3 дня. В 1 л свежеприготовленного сахарного сиропа (1 часть сахара и 1 часть воды) добавляют 200 тыс. ME неомицина и 0,2 г левомицетина. Каждую дозу антибиотиков растворяют в 100 мл кипяченой, охлажденной до 35 °С воде, тщательно смешивают с сиропом и дают по 0,5 л на одну пчелиную семью.

Источник: http://pudmeda.com/article/Gafnioz

Лактозонегативные энтеробактерии: что скрывается под этим определением

В течение жизни по различным причинам приходится сдавать анализ кала. В том числе на дисбактериоз. Получив на руки бланк, начинаешь путаться в названиях, цифрах и степенях. А строчка «лактозонегативные энтеробактерии», вообще, ставит в тупик. Как определить какая бактерия патоген, а какая своя родная и хорошая?

Лактозонегативные энтеробактерии. Общее понятие

Запор может быть признаком повышения лактозонегативных энтеробактерий.

Лактозонегативные энтеробактерии – это группа условно-патогенных микроорганизмов различной степени патогенности.

При нормальных показателях эта микрофлора не оказывает пагубного влияния на организм. Но при дисбактериозе, количество представителей этой флоры увеличивается, вызывая нарушения в работе ЖКТ и прочих органов и систем.

Нормой у детей и взрослых считается показатель не более, чем 10*4 на 1 г каловых масс. Изменение цифр в большую сторону свидетельствует о нарушении иммунитета. Признаки превышения показателей лактозонегативных энтеробактерий:

  • нарушение дефекации – как запор, так и понос;
  • появление подозрительных включений в каловые массы, слизи зеленого или желтого цвета;
  • боли в эпигастрии;
  • метеоризм и вздутие;
  • отрыжка и срыгивание пищи;
  • повышения температуры не наблюдается;
  • развитие аллергических реакций;
  • лактозная недостаточность.

У малышей с тяжелыми формами иммунодефицита может наблюдаться проникновение патогенов в кровь сквозь стенки кишечника. Это представляет угрозу для жизни карапуза.

Лактозонегативные энтеробактерии – типичные представители

Кишечная палочка — представитель группы лактозонегативных энтеробактерий.

В бланке анализа вы увидите общие показатели этой группы и отдельно по каждому виду микроорганизмов. В группу лактозонегативные энтеробактерии входят:

Некоторые из них в небольших количествах являются нормальными обитателями кишечника, другие – не должны присутствовать в микрофлоре человека.

Гемолизирующая кишечная палочка

Кишечная палочка может вызвать перитонит.

Кишечная палочка – это сборное название группы из более 100 разновидностей этого микроорганизма. Этот микроорганизм может жить только в бескислородной среде. Определенные штаммы являются симбионтами человека.

Они обитают в кишечнике и участвуют в процессах переваривания пищи. Некоторые виды палочки Эшериха являются патогенами.

Например, гемолизирующая ее разновидность. Хотя этот штамм может существовать и ничем себя не обнаруживать. Как только иммунитет падает, кишечная палочка начинает размножаться и может вызвать следующие заболевания:

  1. патологии мочевыводящей системы – пиелонефрит, цистит, уретрит;
  2. заболевания репродуктивной системы – аднексит, кольпиты, орхиты;
  3. перитонит;
  4. септические заболевания;
  5. менингит.

Симптоматика дисбактериоза с преобладанием гемолизирующей палочки Эшериха:

  • нарушение дефекации;
  • вздутие;
  • отрыжка;
  • общая слабость;
  • утомляемость;
  • лихорадка;
  • у малышей в фекалиях обнаруживается слизь зеленого цвета;
  • снижение показателей АД.

При поражении прочих систем симптоматика будет отвечать тем заболеваниям, которые вызывала кишечная палочка.

Клепсиелла

Клепсиелла вызывает пневмонию.

Клепсиеллы – это собирательное название штаммов условно-патогенных микроорганизмов. Относятся к факультативным анаэробам.

То есть могут жить как в присутствии кислорода, так и без него. Разновидности этого микроорганизма могут вызвать следующие патологии:

В 1 г. каловых масс должно быть не более 10*5 микроорганизмов. Клепсиеллы являются типичными представителями внутрибольничных инфекций. Источником инфицирования является носитель микроорганизма. С момента заражения до первых симптомов может пройти несколько недель.

При поражении легких наблюдается повышение температуры, кашель поначалу сухой, затем влажный с отхождением зловонной мокроты с кровью. Без лечения развивается сепсис. Смертность составляет 36%. При локализации очага в носу наблюдается зловонные ринореи, заложенность носа, температура. При поражении системы ЖКТ развивается симптоматика острого колита или энтероколита.

Протеи

При увеличении протогенов в организме возникает дисбактериоз.

Протеи – группа факультативно анаэробных микроорганизмов. В небольших количествах обитает в кишечнике человека.

Допустимое количество составляет не более 10*4 шт. на 1 г. фекальных масс. Источником инфекции является больной человек. С момента заражения до появления первых симптомов от 6 часов до 3 суток.

При поражении желудка и кишечника развивается расстройства дефекации, повышается температура тела, частое испражнение крайне зловонными фекальными массами. Кроме этого, развивается острый энтероколит.

При незначительном повышении количества патогенов развивается дисбактериоз. Основной признак поражения протеем – это водянистый зловонный стул более 2 раз в сутки.

При попадании в мочевыводящую или репродуктивную системы наблюдается симптоматика, характерная для воспалительных процессов в этих органах.

Хафнии или гафнии

Хафнии – микроорганизмы, относящиеся к классу энтеробактерии. В настоящее время описан всего 1 вид Н. alvei. Относится к факультативным анаэробам и редко проявляет патогенные свойства. Способна вызывать обострение хронических заболеваний ЖКТ, мочевыводящей системы, септические патологии.

Этот микроорганизм трудно диагностировать, также он редко выступает единственной причиной заболевания. Признаки поражения гафнией сходны с симптоматикой сальмонеллеза – высокой температурой, болями. Зачастую этот патоген путают с кишечной палочкой.

Лечение заболеваний, вызванных хафнией, затрудненно, так как микроорганизм устойчив к антибиотикам последних поколений включая цефаллоспорины.

Серрации

Энтеробактер — обитает в толстом кишечнике человека.

Серрации – это широко распространенный микроорганизм. Является факультативным анаэробом и образует природный краситель красного цвета.

До 60 годов прошлого столетия колонии серрации использовались в качестве красящего вещества для проверки циркуляции воздуха.

Доказано, что 10% внутригоспитальных инфекций вызывают именно эти микроорганизмы. Смертность при поражении этой бактерией составляет 26%.

Серрации способны к передаче через предметы гигиены, катетеры, некачественно обработанный медицинский инструмент, руки медицинского персонала.

Энтеробактеры

Энтеробактер – обитает в толстом кишечнике человека. Считается условно-патогенной бактерией и способен вызывать различные заболевания системы ЖКТ, мочевыводящей и дыхательной системы.

В анализе мочи этот микроорганизм должен содержаться не более 10*5 шт. на 1 мл биологической жидкости. В анализе кала – не более 10*4. Если в моче повышен уровень лейкоцитов, то уровень энтеробактера 10*4 единицы является критичным. Признаки поражения энтеробактером:

Лечение проводится при помощи антибиотиков, бактериофагов, препаратов, улучшающих микрофлору организма.

Цитробактеры

При поражении цинтробактером появляются боли в животе.

Цинтробактер – в норме обитает в кишечнике человека. Но при этом является возбудителем гастроэнтеритов, урологических заболеваний, воспалительных процессов в мозге, сепсиса.

Эти бактерии вызывают тяжелейшие отравления при нарушении технологии приготовления пищи.

Возбудители передаются контактным и орально-фекальным путем. При поражении цинтробактером появляются следующие симптомы:

  1. признаки гастрита – тошнота, рвота;
  2. боли в животе;
  3. повышение температуры до 38 градусов;
  4. стул может быть до 10 раз в сутки;
  5. в фекальных массах обнаруживают слизь.

Бактерия поддается лечению антибиотиками, бактериофагами. Дополнительно показано назначение пробиотиков.

Как выявить патогены?

Для диагностики дисбактериоза следует провести исследование каловых масс. Правила подготовки к исследованию:

  • Забор материала проводят до начала приема антибактериальных препаратов или в промежуток между лечебными курсами. Последний прием антибиотиков должен быть не ранее, чем за 12 часов до забора.
  • Аналогичная тактика при приеме препаратов, улучшающих микрофлору человека.
  • За 3 суток исключить пищу, вызывающую брожение, алкогольные напитки, слабительные препараты.
  • Для исследования требуется кал после естественной дефекации. Не годятся фекальные массы, полученные при промывании кишечника и после слабительных препаратов.
  • Собранные фекалии следует доставить в лабораторию не позднее чем через 2 часа после забора проб. При подозрении на поражение других систем организма проводится бактериальный посев мочи, крови, спинномозговой жидкости.

Лактозонегативные энтеробактерии – это нормальные обитатели нашего организма. Но они могут быть смертельно опасными. Поэтому при хронизации заболеваний воспалительного характера следует сдать анализы и определить возбудителя.

Подробно о кишечной палочке — в тематическом видеоролике:

Расскажите друзьям! Расскажите об этой статье своим друзьям в любимой социальной сети с помощью социальных кнопок. Спасибо!

Вместе с этой статьей читают:

Два года страдаю дисбактериозом кишечника, лечилась у нескольких врачей. Последний раз анализ кала показал бифидобактерии 10*8,лактобактерии 10*7,эшерихии типичные 3,2*10*8,эшерихии лактазонегативные- нет,эшерихии гемолитические- нет, УПЭ р.энтеробактер 4*10*6,энтерококк фекальный 10*9,стафилококков нет,кандиды нет,неферментирующих бактерий нет,клостридий нет.Метеоризм,урчание,кал часто неоформлен. Гастроэнтеролог назначил метронидазол 250 мг 3 р- 7 дн.макмирор 400 мг 2 р. с 8 дня 10 дней, рио флора баланс по 1 т.2 р с 18 дня 3 недели,рио флора иммуно по 1 т.в день 10 дней после р.ф.баланса.Хилак форте по 40 кап.2 р.в день с 1 по 17 день.Копрограмма — оформлен, цвет коричн.,мышечные волокна полуперев 0-1, мышечные волокна перев. 1-3, растит.клетчатка перев.+,крахмал-ед., дрожжевые клетки -ед. Правильно ли назначено лечение? Пока не принимаю.Принимаю тримедат, мумиё, юниэнзим.До сдачи кала 2 недели ничего не принимала.

  • Вика ⇒ Повышенное газообразование в кишечнике: лечение неприятного состояния
  • Марина ⇒ Что такое полипы в желудке? Это опасно?
  • Татьяна ⇒ Какую таблетку выпить от живота – повод для применения и возможные противопоказания к самолечению
  • АННА ⇒ Какую таблетку выпить от живота – повод для применения и возможные противопоказания к самолечению
  • Анна ⇒ Повышенное газообразование в кишечнике: лечение неприятного состояния

Следите за обновлениями сайта в социальных сетях!

Источник: http://pishhevarenie.com/diagnostika/laktozonegativnye-enterobakterii/

Гафнии

Hafnia Møller 1954

  • Hafnia alvei Møller 1954 typus
  • Hafnia paralvei Huys et al. 2010

Растут на простых питательных средах при 22—37 °C, рН 7,2—7,4. На средах для энтеробактерий (Эндо, Левина) образуют бесцветные колонии S-типа, напоминающие колонии шигелл. На среде Плоскирева растут скудно, на висмут-сульфит-агаре не растут. Могут использовать цитрат и ацетат в качестве единственного источника углерода. Ферментируют глюкозу с образованием кислоты и газа; кислоты — маннит, арабинозу, рамнозу, трегалозу, ксилозу. Не ферментируют лактозу, инозит, дульцит, желатину, мочевину, не образуют сероводород и индол, пробы на лизин- и орнитиндекарбоксилазу положительные. При 22 °C подвижны, дают положительную реакцию ФП, отрицательную — с МР, при 37 °C часто неподвижны, проба с МР положительна, с ФП отрицательна. Вид Hafnia alvei по различиям в специфичности О-Аг дифференцируют на 29 серогрупп, Н-Аг — на 49 сероваров.

Обитают во внешней среде (почва, вода, пищевые продукты), выделяются при кишечных инфекциях, уроинфекциях, пневмонии, сепсисе. Бактериологическое исследование проводят так же, как при выделении других условно-патогенных энтеробактерий. Следует дифференцировать с шигеллами и сальмонеллами.

Источник: http://ru-wiki.org/wiki/%D0%93%D0%B0%D1%84%D0%BD%D0%B8%D0%B8

Гафниоз

Гафниоз(паратиф) — инфекционная болезнь, сопровождаемая в конце зимы и весной поносом и гибелью взрослых пчел.

Гафниоз(паратиф) — инфекционная болезнь, сопровождаемая в конце зимы и весной поносом и гибелью взрослых пчел.

Возбудитель болезни — Hafnia alvei (син.— Bacterium paratyphi alvei) — маленькая, с закругленными концами полиморфная палочка, длиной 1—2 мкм и шириной 0,3—0,5 мкм; спор не образует, подвижная (перитрих), хорошо красится всеми анилиновыми красителями, грамнегативная; факультативный анаэроб, растет на всех обычных питательных средах слабощелочной реакции. На агаре уже в течение суток бактерия образует небольшие голубоватые полупрозрачные колонии, легко снимающиеся петлей. На вторые сутки колонии сливаются в общее наложение, приобретают мутный вид, становятся клейкими. Центр колонии буреет, а на ее поверхности образуется возвышение в виде валика. Бактерия дает помутнение бульона и образует в нем следы индола. На поверхности бульона иногда появляется сероватая пленка; желатину не разжижает; молоко не свертывает, на картофеле образует буровато-желтое, иногда серое слабое наложение и издает неприятный запах, напоминающий запах преющего картофеля; разлагает глюкозу, мальтозу, арабинозу, ксилозу, рамнозу, маннит, фруктозу, галактозу и глицерин; не разлагает лактозу, сахарозу, дульцит, адонит, раффинозу, декстрин.

Бактерия Hafnia alvei отличается от паратифозных бактерий тем, что она при 20° приобретает подвижность, а при 37° подвижность отсутствует; при 20° она обладает газообразованием, а при 37° — нет; при 20° расщепляет цитрат аммония, а при 37° — нет.

Бактерия гафния агглютинируется только со специфической сывороткой, к термическим и химическим воздействиям устойчивость слабая. Кипячение в воде убивает микроб в течение 1—2 мин, нагревание до 58 — 60° — в течение 30 мин.

Эпизоотологические данные. Микроб патогенен для пчел и ос; при скармливании бактерий в 5—10%-ном сахарном сиропе вызывает высокую смертность пчел, а при скармливании их в плотной массе из сахарной пудры пчелы живут почти столько же, как и в контролях.

Весной, после выставки семей из зимних помещений, паратиф распространяется от больных семей к здоровым при перестановке сотов, блуждании пчел, пользовании общей поилкой.

Течение и симптомы болезни. Инкубационный период болезни длится 3—14 дней; смертность достигает 50— 60%. Болезнь протекает обычно в конце зимы или весной, а иногда летом после похолоданий и дождей. Развитию болезни зимой способствуют недоброкачественный жидкий мед и сырые помещения. Болеют чаще рабочие пчелы.

Гафниоз не имеет характерных внешних признаков. Скованность в движениях больных пчел, паралич крыльев, слабость и понос представляют собой признаки, встречающиеся и при других болезнях. Больные пчелы слабеют, ползают с раздутым брюшком у летка или на дне улья, теряют способность летать, появляются понос, ослабление дыхательных движений, иногда паралич ножек.

Заболевание в острой форме протекает с большим отходом пчел. При весеннем облете пчелы выделяют много зловонных, очень клейких или полужидких каловых масс темно-бурого цвета. Весенний облет недружный. При осмотре ульев обычно находят достаточные запасы корма, но все соты испачканы экскрементами в виде бурых клейких или жидких масс. При вскрытии больных пчел кишечник вздут и имеет грязно-белый или светлосерый цвет.

Диагноз ставят на основании выделения чистых культур и дальнейшего их бактериологического и серологического исследований. Высевают на агар Эндо содержимое из кишечника и гемолимфу больных пчел или же из мускулатуры (груди) свежепавших трупов или погибающих пчел.

Меры борьбы. Обычно улучшение условий содержания пчел ведет к прекращению болезни. При значительной гибели пчел их кормят трехкратно с недельным интервалом 50%-ным сахарным сиропом с добавлением на 1 л сиропа одного из следующих антибиотиков: левомицетина 0,2 г, стрептомицина 200 тыс. ЕД или биомицина 100 тыс. ЕД.

Похожие статьи:

Сайт пчеловодов 2017

Внимание Ваш браузер устарел!

Если по каким-либо причинам вы не можете обновить Ваш браузер, попробуйте в работе один из этих:

Источник: http://xn--80aeahdxpybbevp5e.xn--p1ai/bolezni-pchel/gafnioz.html

штамм бактерий hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный лт-энтеротоксин

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин. Штамм депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294. Штамм обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин. 1 табл., 2 пр.

Предлагаемое изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Hafnia alvei при производстве вакцин.

Техническим результатом изобретения является штамм Hafnia alvei № 294, который выделен от больного с кишечной инфекцией в 2011 году в Муниципальном учреждении здравоохранения города Ишимбай республики Башкортостан, депонирован в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294, обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин.

Штамм Hafnia alvei ГКПМ № 294 характеризуется следующими признаками.

По биохимическим свойствам штамм относится к семейству Enterobacteriaceae рода Hafnia alvei, поскольку при тестировании на микробиологическомй тест-системе версии «Vitek 2 Sistems: 04/01» соответствовал биохимическим свойствам этого вида.

Растет на обычных универсальных плотных питательных средах с образованием характерных изолированных колоний желтоватого оттенка. В мясопептонном бульоне вызывает равномерное помутнение с выпадением осадка.

Изучение факторов вирулентности показало, что штамм является редким, обладающим комплексом факторов патогенности, способным вызывать острую токсическую пневмонию мышей (гибель животных в течение 3 часов), некроз кожи кролика (3,5 см в диаметре), отек лап мышей (с разницей 95 мг), петля тонкого кишечника кролика 1,2(V/L), обладает (альфатиолзависимый, энтерогемолизин), адгезивной (положительная Д-маннозочувствительная и Д-маннозорезистентная реакция с эритроцитами цыпленка), антиинтерфероновой, антилизоцимной активностями, способный в протистоцидном тесте вызывать гибель инфузорий-туфелек в течение 45 секунд.

Данный штамм рекомендуется в качестве суперпродуцента термолабильного ЛТ-энтеротоксина и как штамм, обладающий комплексом факторов патогенности. Штамм можно использовать в производстве анатоксинов и для получения антитоксической сыворотки.

Способы определения активности ЛТ-энтеротоксина.

Субплантарное введение мышам весомг 0,05 мл центрифугата 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки более 100 мг. Аксенова Е.В., 1980 г.

Интраназальное введение 0,05 мл 20-часовой бульонной культуры вызывает острую токсическую пневмонию у белых мышей-самцов весомг (гибель в течение 4 часов). Войно-Ясенецкая Н.К., 1957 г.

Внутримышечное введение 300 млн микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 3 см.

В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 80 млн м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L=l,2).

Гретый при 56°С в течение 45 мин центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100°С 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L=0,3).

Условия хранения культуры после лиофильной сушки в ампуле или выращенной при 37°С на 0,3%-ном МПА (рН 7,2-7,4), залитым стерильным вазелиновым маслом, при температуре 4°С.

Среды для размножения — бульон Хоттингера (рН 7,2), мясопептонной агар, содержащий 5% эритроцитов кролика при температуре 37°С в течение 24 часов.

Генетические особенности: HLy+, Ent+, MS+, MR+, LT+, ALA+, AKA+. Устойчив к ампициллину, ампициллину/сульбактам, цефуроксимаксетину, чувствителен к фторхинолону.

0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры в физиологическом растворе сеют в стерильный бульон Хотингера (5 мл рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 часов, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 7 минут. Полученную надосадочную жидкость (центрифугат) в объеме 0,05 мл вводят субплантарно в заднюю левую лапку мышей-самцов весомг. Через 24 часа животных умерщвляют эфиром и ампутированные по голеностопному суставу лапки взвешивают на торсионных весах, при этом центрифугат штамма Hafnia alvei № 294 давал разницу между левой и правой лапками не менее 100 мг, остальные 20 штаммов, способные продуцировать ЛТ-энтеротоксин от 65 до 90 мг. Контроли — нативный стерильный бульон Хоттингера (рН 7,2) и гретый при 56°С центрифугат 20-часовой бульонной культурымг, соответственно.

Результаты приведены в таблице.

0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры сеют в бульон Хоттингера (рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 ч и 80 млн м.т. суспензию в объеме 1 мл вводят в сегмент изолированной петли тонкого кишечника кролика. Через 16 часов животных умерщвляют воздушной эмболией и рассчитывают соотношение объема экссудата к длине сегмента (V/L). При этом 20-часовая бульонная культура штамма Hafnia alvei № 294 оказалась способной давать накопление жидкости в большом количестве и показатель V/L составил 1,2. У остальных 20 штаммов, способных продуцировать ЛТ-энтеротоксин, показатель V/L колебался в пределах 0,9-1,0. При введении стерильного бульона Хоттингера и гретой при 100°С 20-часовой бульонной культуры отношение объема накопленной жидкости к длине сегмента составило 0,25 и 0,3 соответственно.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Штамм бактерий Hafnia alvei, обладающий способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин, депонированный в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов III-IV групп патогенности ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России под номером 294.

Источник: http://www.freepatent.ru/patents/